膠體金（colloidal gold），又稱金溶膠（gold solution），是指分散相粒子直徑在l—150nm之間的金溶膠，屬于多相不均勻體系，顏色呈桔紅色到紫紅色。膠體金可以作為標記物用于免疫組織化學，近10多年來膠體金標記已經發展為一項重要的免疫標記技術。膠體金免疫分析在藥物檢測、生物醫學等許多領域的研究已經得到發展，并越來越受到相關研究領域的重視。

膠體金的應用:

１、膠體金在電鏡水平的應用。膠體金應用電鏡水平的研究最早，發展最快，應用最廣泛。其最大優點是可以通過應用不同大小的顆粒或結合酶標進行雙重或多重標記。直徑為3～15nm 膠體金均可用作電鏡水平的標記物。3～15nm 的膠體金多用于單一抗原顆粒的檢測，而直徑15nm 多用于檢測量較多的感染細胞。

膠體金用于電鏡水平的研究，主要包括：①細胞懸液或單層培養中細胞表面抗原的觀察。②單層培養中細胞內抗原的檢測。③組織抗原的檢測。金標記在電鏡水平的應用，主要方法包括：包埋前染色、包埋后染色、免疫負染色、雙標記技術和原位雜交技術等。實驗證明，該法樣本用量少、檢測速度快、對比明顯、操作簡單、敏感性和特異性高，既可用于抗原檢測，也可用于抗體檢測，因此，可同時適用于科研和診斷。

２、膠體金在光鏡水平的應用。膠體金同樣可用做光鏡水平的標記物，取代傳統的熒光素、酶等。各種細胞涂片、切片均可應用。主要用于：①用單克窿抗體或抗血清檢測細胞懸液或培養的單層細胞的膜表面抗原。②檢測培養的單層細胞胞內抗原，③組織中或亞薄切片中抗原的檢測。 膠體金用于光鏡水平的研究，可以彌補其它標記物不可避免的本底過高和內部酶活性干擾等缺點。

３、膠體金在流式細胞儀中的應用。應用熒光素標記的抗體，通過流式細胞儀計數分析細胞表面抗原，是免疫學研究中的重要技術之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊，區分不同的標記困難，因此必須尋找一種非熒光素標記物，用于流式細胞計數。這樣可以同時進行幾種標記。該標記物必須能夠改變散射角，膠體金可以明顯地改變紅激光散射角，因而可以作為流式細胞儀的標記物之一。

４、凝集試驗：單分散的免疫金溶膠呈清澈透明的溶液，其顏色隨溶膠顆粒大小而變化，當與相應抗原或抗體發生專一性反應后出現凝聚，溶膠顆粒極度增大，光散射隨之發生變化，顆粒也會沉降，溶液的顏色變淡甚至變成無色，這一原理可定性或定量地應用于免疫反應。

５、免疫印跡技術(immunoblotting)：免疫印跡是一種較新的免疫化學技術。用聚丙烯酰胺凝膠電泳將蛋白質分離，得到的區帶轉移至硝酸纖維素膜，然后用酶免疫法（或免疫熒光、ＲＩＡ）進行定量。免疫膠體金也可用于該法的定量。轉移后的硝酸纖維素膜與某特異性的抗體保溫后，再與經葡萄球菌Ａ蛋白致敏的膠體金溫育，徹底洗去多余的膠體金，根據膜上膠體金顆粒顏色深淺可測知樣品中的特異性抗原。

６、膠體金在肉眼水平的應用。膠體金取代傳統三大標記物，用于肉眼水平的免疫檢測中。除了膠體金本身具有的特點外，還有以下優點：①試劑和樣本用量極小，樣本量可低至1～2ul；②不需γ－計數器、熒光顯微鏡、酶標檢測儀等貴重儀器，更適于現場應用； ③沒有諸如放射性同位素、鄰苯二胺等有害物質參與；④實驗結果可以長期保存；⑤時間大大縮短，提高了檢測速度。金標過程中，無共價鍵形成，是一定離子濃度下的物理吸附。因此幾乎所有的大分子物質都可被金標記，標記后大分子物質活性不發生改變。實驗結果表明，膠體金的敏感性可達到 ELISA的水平。而結合銀染色時，檢測的敏感性更大大提高。

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